Pewarnaan Ziehl-Neelsen

Tujuan umum    :

Mewarnai sediaan apus menggunakan metode Ziehl Neelsen dengan baik dan Benar.  

Prinsip                  :

Sediaan diwarnai dengan larutan carbol fuchsin 0,3% untuk mewarnai BTA Kemudian dilakukan dekolorisasi dengan asam alcohol 3%. Pada proses ini BTA Tidak akan kehilangan warna merahnya. Dan untuk  membuat kontras/latar Belakang diberikan pewarna tandingan methylen Blue 0,3%, maka akan Tampak  BTA berwarna merah dan yang bukan BTA berwarna biru.

Alat        : 

• Rak pewarnaan
•  Corong lengan
• Pipet pasteur/pipet tetes.
• Pinset.
• Timer.
• Lampu spiritus.

Bahan   :

•  Larutan carbol Fuchsin 0,3%.
•  Larutan asam alcohol 3% 
• Larutan Methylen blue 0,3%
• kertas saring       

Cara Kerja           :

1. Letakan sediaan sputum yang telah difiksasi pada rak dengan apusan menghadap ke atas.
2.  Teteskan larutan carbol fuchsin 0,3% dengan melalui corong yang telah diberi kertas saring pada apusan sputum sampai menutupi seluruh permukaan sediaan sputum.
3. Panaskan dengan nyala api spiritus sampai keluar uap selama 3-5 menit(tidak boleh mendidih/kering).
4. Singkirkan api spiritus, diamkan selama 5 menit.
5. Bilas dengan air mengalir pelan sampai zat warna merah yang bebas terbuang.
6. Tetesi sediaan dengan larutan asam alcohol 3% sampai warna merah fuchsin hilang.
7. Bilas dengan air mengalir pelan.
8. Teteskan larutan methylen blue 0,3% pada sediaan sampai menutupi seluruh permukaan.
9. Diamkan 10 – 20 detik.
10. Bilas dengan air mengalir pelan.
11. Keringkan pada suhu kamar.